Nova Biologica Reperta
یافته های نوین در علوم زیستی
NBR
Basic Sciences
http://nbr.khu.ac.ir
1
admin
2423-6330
2476-7115
10.52547/nbr
en
jalali
1400
10
1
gregorian
2022
1
1
8
4
online
1
fulltext
fa
اثر اگزوزومهای مشتق از مایع مغزی نخاعی بر تمایز عصبی سلولهای بنیادی مزانشیمی چربی در داربست هیدروژل آلژینات
The effect of cerebrospinal fluid-derived exosomes on neural differentiation of adipose mesenchymal stem cells in alginate hydrogel scaffold
علوم جانوری
Animal Biology
مقاله پژوهشی
Original Article
<div style="text-align: justify;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">امروزه محققین تلاشهای گستردهای جهت یافتن روشهای نوین درمانی برای آسیبهای عصبی انجام دادهاند. در این بین نقش اگزوزومها در زمینه ارتباطات سلول </span></span><span style="font-family:Sakkal Majalla;"><span style="font-size:10.0pt;">–</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> سلول به عنوان مکانیسمی نوین قلمداد می</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"></span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">شود. اگزوزومها می</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"></span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">توانند به عنوان عامل تمایزی مناسب عمل کنند. هدف از این پژوهش، بررسی اثر تمایزی اگزوزومهای مشتق از مایع مغزی نخاعی بر سلولهای بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی در هیدروژل آلژینات است. در این مطالعه اگزوزومها به روش اولتراسانتریفوژ از مایع مغزی نخاعی استخراج شده و توسط میکروسکوپ اتمی، میکروسکوپ </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">SEM</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">و تکنیک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">DLS</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">شناسایی شد. همچنین سلولهای بنیادی چربی قرار گرفته در هیدروژل آلژینات تحت تیمار با غلظتهای مختلف اگزوزوم قرار گرفت. بقای سلولها توسط روشهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">و اکردین اورنج اتدیوم بروماید مورد ارزیابی قرار گرفت. بررسی فرایند تمایز سلولها نیز توسط تکنیک ایمنوسیتوشیمی و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Real Time – PCR</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">انجام شد. بررسی هویت اگزوزومها وجود اگزوزومها با اندازه تقریبی 70 نانومتر را تایید کرد. نتایج بقا سلولها نشان دهنده قابلیت بقا و تکثیر سلولها در طی 14 روز است. همچنین</span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">بیان پروتئینهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MAP2</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">پروتئینی همراه با میکروتوبولها</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">)</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Nestin</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">پروتئین فیلامنت بینابینی</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">) با استفاده از روش ایمنوسیتوشیمی مورد تایید قرار گرفت.</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> نتایج حاصل از </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Real Time – PCR</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نشان داد سطح بیان ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MAP2</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">در طی روز هفتم و چهاردم افزایش و بیان ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Nestin</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">در مقایسه با گروه کنترل کاهش معنی داری را نشان می</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"></span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">دهد. این مطالعه نشان داد </span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">اگزوزومهای استخراج شده از مایع مغزی نخاعی می</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"></span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">توانند سبب تمایز عصبی سلولهای بنیادی مزانشیمی چربی در داربستهای هیدروژلی آلژینات شود.</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></span></span><br />
<br />
<span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></span></span></div>
<div style="text-align: justify;">Nowadays, researchers have made extensive efforts to find new treatments for nerve damage. Meanwhile, the role of exosomes in cell-cell communication is considered to be a new mechanism. Exosomes can act as suitable differentiating agents. The aim of this study was to investigate the differentiating effect of cerebrospinal fluid-derived exosomes on adipose mesenchymal stem cells in alginate hydrogel. Exosomes were extracted from the cerebrospinal fluid by ultracentrifugation and were then identified by atomic force microscopy (AFM), SEM and DLS technique. In addition, Adipose Mesenchymal Stem cells in alginate hydrogel were treated with different concentrations of exosomes. Cell survival was assessed by MTT and <em>Acridine Orange</em><em>/<em>Ethidium</em></em> Bromide methods. Cell differentiation was processed by immunocytochemistry and Real-Time PCR. Examinations confirmed the presence of exosomes with an approximate size of 70 nm. Cell survival results indicate that he ability of cells to survive and proliferate during 14 days. Also, the expression of MAP2 proteins (microtubule-associated protein 2) and Nestin (intermediate filament protein) was confirmed by immunocytochemistry. The results of Real Time - PCR showed that during the seventh and fourteenth days the expression level of MAP2 gene increased and the expression of Nestin gene showed a significant decrease compared to the control group. This study showed that exosomes extracted from cerebrospinal fluid can cause neuronal differentiation of Adipose mesenchymal stem cells in alginate hydrogel scaffolds.<span dir="RTL"></span><br />
<br />
<br />
<span dir="RTL"></span></div>
اولتراسانتریفوژ, ایمنوسیتوشیمی, هیدروژل, مهندسی بافت, وزیکولهای برون سلولی
extracellular vesicles, hydrogel, immunocytochemistry, tissue engineering, ultracentrifugation
265
278
http://nbr.khu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1376-1&slc_lang=fa&sid=1
Mojtaba
Cheravi
مجتبی
چروی
mojtaba_cheravi@yaho.com
10031947532846009421
10031947532846009421
No
Department of Biology, faculty of science, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
Javad
Baharara
جواد
بهارآرا
baharara@mshdiau.ac.ir
10031947532846009422
10031947532846009422
Yes
Department of Biology and Research Center for Animal Development Applied Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, Iran
گروه زیست شناسی و مرکز تحقیقات بیولوژی کاربردی تکوین جانوری، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران
Parichehreh
Yaghmaei
پریچهر
یغمایی
yaghmaei_p@srbiau.ac.ir
10031947532846009423
10031947532846009423
No
Department of Biology, faculty of science, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
Nasim
Hayati Roudbari
نسیم
حیاتی رودباری
hayati@srbiau.ac.ir
10031947532846009424
10031947532846009424
No
Department of Biology, faculty of science, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران