fa اثر اگزوزوم‌های مشتق از مایع مغزی نخاعی بر تمایز عصبی سلول‌های بنیادی مزانشیمی چربی در داربست هیدروژل آلژینات علوم جانوری Animal Biology مقاله پژوهشی Original Article <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">امروزه محققین تلاش‌های گسترده‌ای جهت یافتن روش‌های نوین درمانی برای آسیب‌های عصبی انجام داده‌‌اند. در این بین نقش اگزوزوم‌ها در زمینه ارتباطات سلول </span></span><span style="font-family:Sakkal Majalla;"><span style="font-size:10.0pt;">&ndash;</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> سلول به عنوان مکانیسمی نوین قلمداد می</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">‌</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">شود. اگزوزوم‌ها می</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">‌</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">توانند به عنوان عامل تمایزی مناسب عمل کنند. هدف از این پژوهش، بررسی اثر تمایزی اگزوزوم‌های مشتق از مایع مغزی نخاعی بر سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی در هیدروژل آلژینات است. در این مطالعه اگزوزوم‌ها به روش اولتراسانتریفوژ از مایع مغزی نخاعی استخراج شده و توسط میکروسکوپ اتمی، میکروسکوپ </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">SEM</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">و تکنیک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">DLS</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">شناسایی شد. همچنین سلول‌های بنیادی چربی قرار گرفته در هیدروژل آلژینات تحت تیمار با غلظت‌های مختلف اگزوزوم قرار گرفت. بقای سلول‌ها توسط روش‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">و اکردین اورنج اتدیوم بروماید مورد ارزیابی قرار گرفت. بررسی فرایند تمایز سلول‌ها نیز توسط تکنیک ایمنوسیتوشیمی و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Real Time &ndash; PCR</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">انجام شد. بررسی هویت اگزوزوم‌ها وجود اگزوزوم‌ها با اندازه تقریبی 70 نانومتر را تایید کرد. نتایج بقا سلول‌ها نشان دهنده قابلیت بقا و تکثیر سلول‌ها در طی 14 روز است. همچنین</span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">بیان پروتئین‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MAP2</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">پروتئینی همراه با میکروتوبول‌ها</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">)</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Nestin</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">پروتئین فیلامنت بینابینی</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">) با استفاده از روش ایمنوسیتوشیمی مورد تایید قرار گرفت.</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> نتایج حاصل از </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Real Time &ndash; PCR</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نشان داد سطح بیان ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MAP2</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">در طی روز هفتم و چهاردم افزایش و بیان ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Nestin</span></span></span> <span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">در مقایسه با گروه کنترل کاهش معنی داری را نشان می</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">‌</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">دهد. این مطالعه نشان داد </span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">اگزوزوم‌های استخراج شده از مایع مغزی نخاعی می</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">‌</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">توانند سبب تمایز عصبی سلول‌های بنیادی مزانشیمی چربی در داربست‌های هیدروژلی آلژینات شود.</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></span></span><br /> <br /> <span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></span></span></div> <div style="text-align: justify;">Nowadays, researchers have made extensive efforts to find new treatments for nerve damage. Meanwhile, the role of exosomes in cell-cell communication is considered to be a new mechanism. Exosomes can act as suitable differentiating agents. The aim of this study was to investigate the differentiating effect of cerebrospinal fluid-derived exosomes on adipose mesenchymal stem cells in alginate hydrogel. Exosomes were extracted from the cerebrospinal fluid by ultracentrifugation and were then identified by atomic force microscopy (AFM), SEM and DLS technique. In addition, Adipose Mesenchymal Stem cells in alginate hydrogel were treated with different concentrations of exosomes. Cell survival was assessed by MTT and <em>Acridine Orange</em><em>/<em>Ethidium</em></em> Bromide methods. Cell differentiation was processed by immunocytochemistry and Real-Time PCR. Examinations confirmed the presence of exosomes with an approximate size&nbsp;of 70 nm. Cell survival results indicate that he ability of cells to survive and proliferate during 14 days. Also, the expression of MAP2 proteins (microtubule-associated protein 2) and Nestin (intermediate filament protein) was confirmed by immunocytochemistry. The results of Real Time - PCR showed that during the seventh and fourteenth days the expression level of MAP2 gene increased and the expression of Nestin gene showed a significant decrease compared to the control group. This study showed that exosomes extracted from cerebrospinal fluid can cause neuronal differentiation of Adipose mesenchymal stem cells in alginate hydrogel scaffolds.<span dir="RTL"></span><br /> &nbsp;<br /> <br /> <span dir="RTL"></span></div> اولتراسانتریفوژ, ایمنوسیتوشیمی, هیدروژل, مهندسی بافت, وزیکول‌های برون سلولی extracellular vesicles, hydrogel, immunocytochemistry, tissue engineering, ultracentrifugation 265 278 http://nbr.khu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1376-1&slc_lang=fa&sid=1 Mojtaba Cheravi مجتبی چروی mojtaba_cheravi@yaho.com 10031947532846009421 10031947532846009421 No Department of Biology, faculty of science, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Javad Baharara جواد بهارآرا baharara@mshdiau.ac.ir 10031947532846009422 10031947532846009422 Yes Department of Biology and Research Center for Animal Development Applied Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, Iran گروه زیست شناسی و مرکز تحقیقات بیولوژی کاربردی تکوین جانوری، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران Parichehreh Yaghmaei پریچهر یغمایی yaghmaei_p@srbiau.ac.ir 10031947532846009423 10031947532846009423 No Department of Biology, faculty of science, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Nasim Hayati Roudbari نسیم حیاتی رودباری hayati@srbiau.ac.ir 10031947532846009424 10031947532846009424 No Department of Biology, faculty of science, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران