fa مهار تکثیر رده سلولی سرطان مری (KYSE-30) توسط متابولیت‌های ثانویه باکتری‌های اندوفیت افدرا میکروبیولوژی Microbiology مقاله پژوهشی Original Article <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">با توجه به افزایش نرخ بروز سرطان مری در برخی کشور‌های آسیایی از جمله مناطق شمال و شمال&shy;شرق ایران، شناسایی ترکیبات ضد&shy;سرطانی جدید برای سرکوب این بیماری ضروری است. امروزه اثبات گردیده که تولید بسیاری از متابولیت‌های گیاهی با فعالیت میکروارگانیسم‌های اندوفیت در ارتباط است. در این پژوهش توانمندی باکتری‌های اندوفیت گیاه دارویی افدرا در مهار تکثیر رده سلولی سرطان مری (</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">KYSE-30</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">) ارزیابی شد. 54 سویه باکتری اندوفیت (از 74 جدایه اولیه) از دو گیاه دارویی </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Ephedra intermedia</span></span></span></span></em> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">و </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Ephedra</span></span></span></span></em> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">foliata</span></span></span></span></em> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">پس از استریل کردن سطح آن‌ها به&shy;دست آمد. باکتری‌ها در محیط کشت تریپتیک سوی براث (</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">TSB</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">) تلقیح و پس از 72 ساعت متابولیت‌های تولید شده با استفاده از کلروفرم استخراج گردید. اثر عصاره خام سویه‌های منتخب بر روی رده‌ سلولی سرطان مری </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">KYSE-30</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> با آزمون </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> در بازه&shy;‌های زمانی 24، 48 و 72 ساعت ارزیابی گردید. در نهایت سویه مورد</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">نظر با استفاده از تکثیر و توالی</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">&shy;</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">یابی ژن </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">16S rRNA</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> شناسایی شد. بر اساس نتایج آزمون</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT </span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;سویه </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">A1</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> دارای فعالیت ضد&shy;سرطانی بر روی رده سلولی </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">KYSE-30</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> با مقادیر </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">IC₅₀</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> برابر با 4/346، 8/192 و</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">3/121 میکروگرم بر میلی</span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">&shy;</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;">لیتر به ترتیب در زمان‌های 24، 48 و 72 ساعت پس از تیمار بود. بر اساس شناسایی مولکولی، باکتری مذکور به</span></span></span> <em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Microbacterium maritypicum</span></span></span></span></em><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> شباهت داشت. با توجه به توانایی جدایه </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">A1</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> در مهار تکثیر و زنده مانی </span></span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">KYSE-30</span></span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"> استفاده از ترکیبات طبیعی تولید شده توسط این باکتری برای درمان سرطان مری امکان&shy;پذیر است. هرچند جهت تایید این نتایج آزمایش‌های بیشتری پس از خالص&shy;سازی مواد موجود در عصاره و همچنین انجام مطالعات در مدل‌های جانوری سرطانی ضروری است.</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></span></span><br /> &nbsp;<br /> <br /> <span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></span></span> <div style="text-align: justify;">Regarding the rising rate of esophageal cancer in some parts of Asia, including northern and northeastern regions of Iran, the identification of new anti-cancer compounds is essential to combat the disease. The relation between some plants metabolites and these endophytic microorganisms are well characterized. In the current study, the potentials of <em>Ephedra</em> endophyte bacteria for the inhibition of esophageal cancer cell line (KYSE-30) proliferation were investigated. A total of 54 endophyte bacteria (out of 70) were obtained from the sterilized surfaces of two medicinal plants, i.e., <em>Ephedra intermedia</em> and <em>Ephedra foliata</em>. Bacterial strains were then cultured in Tryptic soy broth (TSB) medium and, after 72 h incubation, the produced secondary metabolites were extracted by chloroform. Anticancer effects of secondary metabolites from theses bacteria on esophageal cancer cell line KYSE-30 were evaluated after 24, 48 and 72 h by MTT method. MTT assay results showed that only strain A1 had a cytotoxic effect on KYSE-30 cells. The IC₅₀amounts of this strain against KYSE-30 cell lines were equaled (&micro;g/ml) to 346.4, 192.8 and 121.3 after 24, 48, and 72 hours, respectively. The molecular identification of strain A1 revealed that <em>Microbacterium maritypicum </em>(99.8%&nbsp;similarity) was the closest identified taxon to the strain studied. According to the promising ability of strain A1 to inhibit the growth of KYSE-30 cell line, the use of natural compounds produced by this bacterium to treat esophageal cancer was found to be applicable. However, more experiments are needed to confirm these results after purifying the ingredients, as well as conducting studies in animal cancer models. <strong><span dir="RTL"></span></strong><br /> &nbsp;<br /> <br /> <span dir="LTR"></span></div> اکتینوباکتر, سمیت سلولی, گیاهان دارویی, میکروباکتریوم, همزیستی Actinobacter, cytotoxic effect, medicinal plant, Microbacterium, Symbiosis 95 103 http://nbr.khu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-424-1&slc_lang=fa&sid=1 Mehrdad Ghiasvand مهرداد غیاثوند mehrdad.ghiasvand@mail.um.ac.ir 10031947532846009052 10031947532846009052 No Department of biology, Faculty of Science, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran گروه زیست شناسی، داتشکده علوم، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران Ali Makhdoumi علی مخدومی a.makhdomi@um.ac.ir 10031947532846009053 10031947532846009053 Yes Department of biology, Faculty of Science, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran گروه زیست شناسی، داتشکده علوم، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران Maryam Moghaddam Matin مریم مقدم متین matin@um.ac.ir 10031947532846009054 10031947532846009054 No Department of biology, Faculty of Science, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran; Institute of Biotechnology, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran گروه زیست شناسی، داتشکده علوم، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران؛ پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران Jamil Vaezi جمیل واعظی vaezi@um.ac.ir 10031947532846009055 10031947532846009055 No Department of biology, Faculty of Science, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran گروه زیست شناسی، داتشکده علوم، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران