fa جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری های تولیدکننده کاروتنوئید میکروبیولوژی Microbiology مقاله پژوهشی Original Article <p><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">تولید رنگدانه از باکتری&shy; ها به علت مقرون به صرفه بودن، محصول بیشتر و استخراج آسان&shy;تر نسبت به سایر منابع از اهمیت خاصی برخوردار است</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">کاروتنوئید&shy;ها، از مهمترین رنگدانه&shy; ها با خواص آنتی &shy;اکسیدانی، پیش &shy;ساز ویتامین</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">A </span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">، افزایش &shy;دهنده تولید آنتی &shy;بادی، ضد تومور و پیشگیری کننده از بیماری &shy;های قلبی-عروقی هستند</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;"> هدف از این مطالعه جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری&shy; های تولیدکنندۀ رنگدانه&shy; کاروتنوئیدی و آنالیز آن با</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">HPLC</span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;"> بود. تعداد 20</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">نمونه خاك از مناطق مختلف شهر تهران جمع &shy;آوري شد.</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">پس از رقت&shy; سازی، نمونه &shy;ها بر روی محیط</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">BHI </span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">آگار کشت و در دمای 37 درجه&shy; سانتی&shy; گراد گرماگذاری شد.</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">باکتری&shy; های تولیدکننده رنگدانه برای شناسایی بیشتر انتخاب و</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">استخراج رنگدانۀ آنها بوسیله&shy; متانول انجام شد.</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">غربالگری باکتری&shy; های تولیدکننده&shy; رنگدانه در دو سطح انجام گرفت: انتخاب سویه&shy; ها با استفاده از رنگ قابل مشاهده؛ آنالیز عصاره ها با طیف سنجی</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;"> UV-VIS </span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">و تأیید توسط کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">.(HPLC) </span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;ابتدا، جدایه &shy;ها با استفاده از روش&shy; های فنوتیپی شناسایی شد و ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">16S rDNA</span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;"> آنها با روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">PCR</span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;"> تکثیر و تعیین توالی شد. </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Staphylococcus epidermidis</span></span></em><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Micrococcus aloeverae</span></span></em><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Citricoccus alkalitolerans</span></span></em><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Rhodococcus zopfii</span></span></em><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Arthrobacter</span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;"> <em>agilis</em></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">،</span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Dietzia natronolimnaea</span></span></em><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;"> و</span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Rhodococcus ruber</span></span></em> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;به&shy; عنوان سویه های تولیدکنندۀ کاروتنوئید شناسایی شدند</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">بالاترین میزان جذب با استفاده از آنالیز طیف &shy;سنجی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">UV-VIS</span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;"> در </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Staphylococcus epidermidis</span></span></em><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;"> و</span></span> <em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Dietzia natronolimnaea</span></span></em> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">مشاهده شد.</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">آنالیز</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;"> HPLC </span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">نشان داد که کاروتنوئیدهای تولید شده در مقایسه با منحنی بتا&shy;کاروتن استاندارد، متعلق به بتاکاروتن هستند</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;"> میکروارگانیسم&shy; ها منبع بالقوه &shy;ای برای تولید کارتنوئیدها هستند. در این مطالعه، ما دو جنس باکتری (</span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Staphylococcus epidermidis</span></span></em><em><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;"> و</span></span></em> <em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Dietzia natronolimnaea</span></span></em><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:10.0pt;">) با توانایی بالای تولید کارتنوئید معرفی کردیم. </span></span><br /> &nbsp;</p> <div>The production of pigments from bacteria is significant due to the low cost, high yield and ease of extract compared with other sources. Carotenoids are one of the most important pigments with antioxidant properties which are the precursor of vitamin A synthesis and have antibody overproduction ability, anti-tumor activity and inhibitory effect on the cardiovascular disease. The present study aimed to isolate and identify carotenoid-producing bacteria by high-performance liquid chromatography (HPLC) analysis of their carotenoid pigments. Twenty soil samples were collected from different regions of Tehran. After serial dilution each sample was cultured on BHI agar medium and incubated at 37&deg;C. The pigment-producing bacteria were selected for further identification and their pigments were extracted by methanol. The screening was carried out at two levels: i) selection of the strains by visual color inspection, ii) analysis of the pigment extracts by UV-VIS spectroscopy and HPLC. The isolates were identified by phenotypic methods and their 16S rDNA gene was amplified by PCR method and sequenced. <em>Staphylococcus</em> <em>epidermidis</em>, <em>Micrococcus</em> <em>aloeverae</em>, <em>Citricoccus</em> <em>alkalitolerans</em>, <em>Rhodococcus</em> <em>zopfii</em>, <em>Arthrobacter</em> <em>agilis</em>, <em>Dietzia</em> <em>natronolimnaea</em> and <em>Rhodococcus</em> <em>ruber</em> were identified as carotenoid-producing strains. The highest rate of absorption was observed using UV-VIS analysis in <em>Staphylococcus</em> <em>epidermidis</em> and <em>Dietzia</em> <em>natronolimnaea</em>. The comparison of HPLC analysis with the standard &beta;-carotene curve showed that the carotenoids were beta-carotene. Micro-organisms are a potential source in the production of pigments. In this study we introduced two genera of bacteria (<em>Staphylococcus epidermidis</em> and <em>Dietzia natronolimnaea</em>) with carotenoid-producing ability.<br /> &nbsp;<br /> &nbsp;</div> <p></p> بتاکاروتن, رنگدانه, کاروتنوئید, کروماتوگرافی, طیف سنجی β-carotene, carotenoids, chromatography, pigment, spectrophotometry 61 69 http://nbr.khu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-475-1&slc_lang=fa&sid=1 Razieh sadat Solouki Nezhad راضیه سادات سلوکی نژاد slokinejad@taxilux.ir 10031947532846006966 10031947532846006966 No Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Islamic Azad University, Science and Research Branch, Tehran, Iran. گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران. Hanieh Asaadi حانیه اسعدی hanie.asaadi@yahoo.com 10031947532846006967 10031947532846006967 No Department of Microbiology and Parasitology, Faculty of Medicine, Bushehr University of Medical Sciences, Bushehr, Iran. گروه میکروب‌شناسی و انگل‌شناسی ، دانشکدۀ پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بوشهر، بوشهر، ایران. Yaser Eshaghi Milasi یاسر اسحاقی میلاسی 10031947532846006968 10031947532846006968 No Shahrekord University دانشگاه شهرکرد Sajjad Yazdansetad سجاد یزدان ستاد sajjad.yazdansetad@gmail.com 10031947532846006969 10031947532846006969 Yes Department of Microbiology, School of Medicine, Golestan University of Medical Sciences, Gorgan, Iran. گروه میکروب‌شناسی، دانشکدۀ پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران.